Protocolo celulas competentes




  1. Glicerol stock XL1 Blue/ DE3(E.Coli) +L.B( 10ml)-------à O/N at 37ºC
  2. 0.200ml en 22ml de LB---à crecer 1h30min-à hasta absorbance 0.2-0.3
  3. Centrifugar 10min -2700g -4ºC
  4. Decantar sobrenadante
  5. Add 5ml de CaCl2 ( poner en hielo) y resuspender bien ;durante 1h 30min
  6. Centrifugar 10min – 2700g- 4ºC
  7. Resuspender 1ml CaCl2 y dejar 1h30min en hielo.
  8. Cels competentes guardar -80ºC